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常见问题

长沙美牛生物科技有限公司

如何优化微球在试条上的释放?


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微球在层析试条上的释放问题目前是业界非常头痛的问题,因为不管是乳胶微球还是胶体金微球,都非常难彻底的从乳胶垫或者金标垫上完全、同步的释放。但是在这些乳胶垫配方优化当中,还是有一些规律可以寻找。美牛生物建议你从最简单的配方进行优化,首先从缓冲液与糖类着手,然后从蛋白类,最后是表面活性剂以及其他辅料。不建议采用专利、文献资料的配方着手,因为这样反而会耽搁你的优化时间。其次也需要考虑乳胶垫的材料。两个方面相互结合会大大提高微球的释放能力。

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不同的化学发光项目该选择什么类型的磁珠?


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化学发光磁珠选择是一个比较难的问题,研发项目太多,有标记抗原、有标记抗体甚至有标记糖类物质,所以很难采用一种微球解决所有问题。但是不管怎么复杂,先根据公司的实际情况来决定,如果需要项目研究快,那就选SA磁珠,但是后续试剂成本相对会高一点,如果需要快速的标准化操作,那选择Tosyl磁珠、环氧基磁珠以及预活化磁珠都是可以的,如果自己能力比较强,对标记技术挺熟悉,那选择性价比最高的羧基磁珠也挺好的。另外,还需要考虑抗原或者抗体的特性,因为有些抗原或者抗体实在是非常难标记的,他们与微球的结合能力很差或者微球空间位阻限制了抗体的性能。因此需要根据多个因素来综合考虑选用何种磁珠更合适。

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优质化学发光磁珠的特征?


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优质的化学发光磁珠的特性主要是:1)单分散性;2)超顺磁性,也就是磁吸后磁珠不成线;3)磁性强,应当在20S内磁吸完成;4)无磁残,磁吸后溶液澄清透明;5)粒径均一,偏差在5%以内;6)偶连抗体能力强,并且保障抗体不脱落;7)非特异性吸附非常小,这个相当关键,因为这个是影响信噪比的关键所在;8)磁珠不板结,分散容易,同时在溶液中悬浮性比较好; 9)磁珠耐受有机溶剂以及pH值在4-12之间溶液等;10)磁珠偶连蛋白后,偶连蛋白的性能稳定。美牛磁珠都能完全满足上述要求,是您不错的选择。

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层析乳胶微球(如时间分辨微球、彩色微球等)使用到最后剩下的一些溶液怎么处理?


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很多客户咨询层析乳胶微球使用到最后剩下的溶液怎么处理,这个确实是一个比较难处理的问题,因为最后的溶液往往有很多的乳胶颗粒成团了(管口或者管壁微球干燥后掉落进去的),这些颗粒严重干扰了正常标记处理流程,导致最后结果不理想。如果丢弃,那损耗其实比较大,因此比较难处理。那如何解决这个问题,我的建议是先将管中的球水浴超声分散,然后采用2000-3000转/分钟的离心机离心1-2分钟,然后取出溶液,再稀释10倍,最后用探头式细胞破碎仪处理,直到微球全部分散均匀。

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乳胶微球(层析乳胶微球、比浊乳胶微球)的保存条件?


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乳胶微球的保存条件是根据乳胶微球的性质来决定,如时间分辨微球是需要保存在避光环境的,白色乳胶微球就不需要避光保存,避光环境也并不是需要时时刻刻都避光,其实微球没有这样脆弱,1-2小时不避光对时间分辨微球其实影响并不大。另外就是温度的影响,微球在4-40℃范围内长期保存其实是没有太多影响的,为什么都建议在2-8℃保存,这个主要是为了抑制细菌的滋生。微球最怕的是冻融,裸球经过冻融后,是非常难恢复的,会出现严重的团聚问题。

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如何选择合适的荧光微球做定量层析?


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目前,市场上的荧光微球有很多种,根据荧光物质的不同,可以分为时间分辨荧光微球、普通荧光微球(红色荧光微球、粉红色荧光微球),根据荧光微球制备工艺不同,可以分为荧光染料包裹微球、染色荧光微球、荧光物质交联在微球表面的微球。根据荧光微球大小分可以分为1微米级以上、0.1微米级以上、0.1微米级以下等级别。   怎么样的荧光微球适合做荧光定量层析,这个问题需要从以下几个方面需要考虑: 1)、荧光微球性噪比高,因为只有单个微球的荧光放大效应高,才能使定量层析试条的灵敏度高。 2)、荧光稳定。这个需要从几个方面来讨论:   (1) 微球中荧光染料不能够在微球加工、处理过程中泄露。   (2)荧光微球悬浮在PH值4-10之间的溶液中,微球的荧光强度不会发生变化。   (3)将荧光微球固定在层析试条上,做成仪器的标准色卡后,标准色卡的荧光强度不随试条的放置时间、温度、测试次数、激发光强度等因素的影响而发生变化。   (4)微球在水溶液中长期放置,荧光强度不会随着时间的延长而下降。 3)微球的均一性。对于层析试条来说,由于NC膜的孔径并不是均一的,如果微球不均匀,那就会导致微球在膜上流动更加不均一,从而导致试条的检测结果CV差。因此需要微球均一性很好。 4)、微球大小,根据目前市面上常用的NC膜的孔径大小,荧光微球的最佳大小在200nm-500nm之间,微球太小,单个微球包裹的荧光染料不多,从而导致信噪比不高。微球太大,微球在NC膜上的流动速度会非常慢。试条背景荧光高,试条检测时间长。因此在200nm-500nm之间,其中最优是在300nm左右。    美牛生物制备的微球完全能够满足上面的应用要求,单个微球的荧光强度非常高,荧光非常稳定,微球PDI系数可以控制在0.03以下,同时荧光微球的每批生产量可以达到5L以上左右。批间荧光强度非常稳定,批间微球平均粒径可以控制在15nm以内。

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